Prozone effects in microscopic agglutination tests for leptospirosis in the sera of mice infected with the pathogenic Leptospira interrogans serovar Canicola

Mice experimentally infected with a pathogenic strain of Leptospira interrogans serovar Canicola produced false negative results (prozone effect) in a microscopic agglutination test (MAT). This prozone effect occurred in several serum samples collected at different post-infection times, but it was more prominent in samples collected from seven-42 days post-infection and for 1:50 and 1:100 sample dilutions. This phenomenon was correlated with increased antibody titres in the early post-infection phase. While prozone effects are often observed in serological agglutination assays for the diagnosis of animal brucellosis and human syphilis, they are not widely reported in leptospirosis MATs.

Frequency of Leptospira spp. in sheep from Brazilian slaughterhouses and its association with epidemiological variables / Frequência de Leptospira spp. em ovinos abatidos em matadouros brasileiros e sua associação com variáveis epidemiológicas

Leptospirosis is a worldwide anthropozoonosis that infects livestock, including sheep as the carriers to other animals and humans. The present study aimed to determine the prevalence of Leptospira spp. in sheep from two slaughterhouses in the state of São Paulo, Brazil and its association with epidemiological variables. Serum samples from 182 sheep were evaluated for Leptospira spp. antibodies by microscopic agglutination test (MAT). Results indicated 34/182 (18.68%; CI95% 13.70-24.98%) positive serum samples, mainly to the serovar Copenhageni (17/34; 50%; CI95% 33.99-66.01%). Bacterial growth in the Fletcher medium was detected for 13/34 (38.24%; CI95% 23.87-55.08%) animals, and confirmed by Polymerase Chain Reaction (PCR) and sequencing for only two kidney samples from two animals. Thus, treatment and vaccination of sheep, besides rodent control, can be useful to prevent the infection in the studied region since sheep are important Leptospira spp. carriers, and its transmission to slaughterhouse workers is mainly through the manipulation of visceral tissues.

A leptospirose é uma antropozoonose mundialmente distribuída que infecta animais de produção, incluindo as ovelhas como carreadores para outros animais e o homem. O presente estudo objetivou determinar a prevalência de Leptospira spp. em ovinos de dois abatedouros do estado de São Paulo e sua associação com algumas variáveis epidemiológicas estudadas. Amostras de soro de 182 ovinos foram pesquisadas para a presença de anticorpos para Leptospira spp. pela soroaglutinação microscópica (SAM). Os resultados indicaram 34/182 (18,68%; IC95% 13,70-24,98%) amostras positivas, principalmente para o sorovar Copenhageni (17/34; 50%; IC95% 33,99-66,01%). Crescimento bacteriano no meio de Fletcher foi observado em amostras de 13/34 (38,24%; CI95% 23.87-55.08%) animais, e confirmados pela Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) e seqüenciamento para somente duas amostras renais de dois animais. Assim, o tratamento e vacinação dos ovinos, além do controle de roedores, pode ser útil na prevenção da infecção na região estudada, visto que os ovinos são importantes carreadores de Leptospira spp. para o homem, e sua transmissão aos trabalhadores de abatedouros ocorre principalmente pela manipulação das vísceras.

Investigação soroepidemiológica de leptospirose canina na área territorial urbana de Botucatu, São Paulo, Brasil / Seroepidemiological inquiry of canine leptospirosis in the urban area from Botucatu, Sao Paulo State, Brazil

Investigou-se, soroepidemiologicamente, a leptospirose em 775 cães do município de Botucatu - SP, em amostras de sangue, obtidas durante a campanha anual de vacinação anti-rábica, coletadas de 14 postos de vacinação, distribuídos geograficamente, representando o total de 45 postos de cinco regiões do Município, com uma área territorial urbana de 31km². Do total de amostras, 449 eram de machos, e 326, de fêmeas; 564 eram de animais sem raça definida, e 211, puros. As idades variavam de três meses a 20 anos. Para o diagnóstico, foi realizada a soroaglutinação microscópica, utilizando-se 12 sorovares de Leptospira spp. A comparação entre o resultado do exame sorológico e as variáveis epidemiológicas foi realizada pelos testes de Goodman e do Qui-quadrado, comα= 0,05. Obtiveram-se 119 (15,3%) amostras positivas, com reação para 11 sorovares, com maior importância para o canicola, em 48 (40,3%) amostras, e pyrogenes, em 41 (34,5%). Pela análise estatística, encontrou-se diferença significativa em relação à raça – positividade em 17,7% dos animais sem raça definida e em 9,0% dos demais – e sexo – positividade em 18,4% de machos e 11,0% de fêmeas. Quanto à idade, não houve diferença significativa, com distribuição uniforme entre as faixas etárias estabelecidas.

Leptospirosis was seroepidemiologically investigated in 775 dogs from Botucatu, state of Sao Paulo, in blood samples collected during the annual anti-rabies vaccination campaign. The samples were collected from 14 out of the 45 vaccination stations geographically distributed in five different municipal districts, with a territorial urban area of 31km². Samples were taken from 449 males and 326 females; 564 were of undetermined breed, and 211 were pedigree animals; ages ranged from 3 months to 20 years. Diagnosis included the microscopic serum agglutination tests using 12 Leptospira spp serovars. Serological results and epidemiological variables were compared using Goodman and chi-square tests, withα=0.05. There were 119 (15.3%) positive samples for 11 serovars; the most important was canicola with 48 (40.3%), followed by pyrogenes 41 (34.5%). Statistical analysis showed significant difference for: breed, 17.7% positive in undetermined breeds and 9.0% in pedigrees; and sex, 18.4% positive in males and 11.0% in females. There was no statistically significant difference in relation to age with uniform distribution of positives.

Pesquisa de suínos portadores renais de leptospiras pelo isolamento microbiano e reação em cadeia pela polimerase em amostras de rins de animais sorologicamente positivos e negativos para leptospirose / Searching of swine leptospiral carrier by microbial isolation and polymerase chain reaction in kidney samples from serologically positive and negative animals

Com o intuito de se estudar a presença de suínos portadores renais de leptospiras foram colhidas 131 amostras sanguíneas e os respectivos rins de animais durante o abate em abatedouro da região de Botucatu-SP. Pela prova de Soroaglutinação Microscópica obteve-se 48 amostras sorológicas positivas para um ou mais sorovar de Leptospira spp., com uma taxa de ocorrência de anticorpos anti-leptospira de 36,64 por cento, e maior importância para o sorovar icterohaemorrhagiae. Para a pesquisa do agente nos rins, das 88 amostras renais submetidas a cultura em meio de EMJH e analisadas pela prova de PCR, foi isolado e detectado o agente em uma única amostra renal, pertencente a um animal soropositivo. Embora não tenha sido possível a comparação estatística, em termos de sensibilidade e especificidade das duas provas de detecção do agente a partir de amostras renais, a PCR mostrou-se mais rápida e prática na pesquisa de portadores renais. Pelo isolamento obtido, ressalta-se a importância desses animais como possíveis transmissores da doença para trabalhadores de abatedouro e inspetores de carne.